Тело человека №02, страница 14

ПАТОЛОГИЯ: Вирусология

Анализ образцов крови

ПО-г! Ш

Тестирование на ВИЧ включает анализ крови на присутствие антител к ВИЧ. Если они обнаружены, следует провести подтверждающие тесты.

Наиболее известный тест на ВИЧ - это иммуноферментный анализ (ELISA). Он заключается в помещении образцов крови в U-образные лунки тест-планшета, поверхность которых покрыта белками ВИЧ. В течение определенного периода вирус и образец сыворотки инкубируют вместе. Затем лунки промывают. Если в сыворотке нет антител, пробы вымываются. Если антитела к ВИЧ присутствуют, то они связываются с бачками ВИЧ, покрывающими дно ячеек.

ДЕТЕКЦИЯ ВИРУСА Следующий шаг - добавление индикатора, который показывает, что антитела связались с вирусом и образовали комплекс ан-тиген-антигело. В качестве индикатора выступает меченый ферментом иммуноглобулин. На второй стадии детекции происходит его присоединение к имеющемуся комплексу антиген-антитело и отмечается цветная реакция, интенсивность которой зависит от количества связанных сывороточных антител.

УСТРАНЕНИЕ ОШИБОК Сотрудники лаборатории возвращаются к исходной пробе крови (которая была разделена), чтобы проанализировать ее вновь, используя различные типы тестов на ВИЧ. Это необходимо, чтобы исключить вероятность ошибки и подтвердить результат. Последним проводится анализ пробы для дифференциации 1 и 2 типа ВИЧ, поскольку их прогноз несколько различен, а информация важна для эпидемиологических (популяцион-ных) исследований. Положительный анализ на ВИЧ-антитела регистрируется, но желательна дополнительная проба, подтверждающая, что не было допущено ошибок во время взятия предыдущей. Это маловероятно, но иногда возможны проблемы из-за неправильной записи фамилии или номера.

Результаты анализа должны быть переданы специалисту, который проводит консультирование. Если получен положительный результат, то следует взять образец крови через несколько недель, чтобы установить точное количество вируса в крови (тест на вирусную нагрузку).

шм

А Л

a ^ Детекция ВИЧ-антител

Вирусные частицы (вирус показан зеленым) связываются с поверхностью белых клеток крови.

Образцы крови добавляются в ячейки тест-планшета при помощи мультипипетки, позволяющей провести несколько тестов одновременно.

Твердофазный иммуноферментный анализ ТИФА (в англ. - ELISA) - метод оценки присутствия ВИЧ-антител в пробе крови пациента.

МШ ^

^ Л: s^sj-' v?*

Г*-** iJS?

ВИЧ-антигены

Тест ячейки покрыты слоем белка ВИЧ

ВИЧ-антитела

Если антитела присутствуют в крови (из-за того, что субъект был инфицирован ВИЧ), они связываются с белком ВИЧ.

Лунка

U-образное углубление в пластиковом планшете для тестирования ВИЧ

Белковые фрагменты ВИЧ (антигены), которые, как известно, вызывают иммунный ответ, наносятся на основания лунок пластикового тест-планшета.

в "ю

Фермент

Биологический катализатор, химически связанный со вторичными антителами.

— Вторичные «индикаторные» антитела

Вводится другой вид антител, которые специфичны к ВИЧ-антителам. Они связываются с ВИЧ-антителами.

Добавляют пробу крови. Если присутствуют антитела к ВИЧ, они тесно связываются с антигенами. Ячейку промывают, чтобы удалить остальной материал.

Индикатор

Химическое вещество, специфичное для фермента. Если все антитела связаны, индикатор реагирует с ферментом, изменяя цвет.

Добавляют другой тип антител, которые связываются с ВИЧ-антителами. Эти «детекторные» антитела в свою очередь связаны с ферментом, который катализирует реакцию на следующей стадии тестирования.

Наконец добавляется вещество, для которого фермент специфичен. Если тест положительный_f оно изменяет цвет, что может быть подтверждено при помощи читающего аппарата.