Юный техник 1975-02, страница 57

ческого слова «хрома» — цвет, краска), а метод разделения получил название хроматографиче-ского, хотя им можно разделять и не только окрашенные вещества.

В отличие от хроматографии разделение методом экстракции заключается в обработке смеси жидким растворителем, в котором вещества смеси растворяются по-разному. Если нужно разделить, скажем, кристаллический йод и сахар, удобнее всего это сделать экстракцией. В отличие от сахара йод в воде почти нерастворим. Если ту же смесь поместить в спирт, то сахар и йод поменяются ролями. Вода и спирт служат селективными экстраген-тами для сахара и йода.

ХИМИЧЕСКИЕ СВИДЕТЕЛИ

Когда Мартин и Синг разделяли аминокислоты, они применили метод экстракции, а закрепить селективный экстрагент неподвижно решили на порошке си-ликагеля (SiCb). Ученые пропитали силикагель экстрагентом, поместили порошок в колонку и через нее стали пропускать водный раствор аминокислот. Вспомните опыт Цвета. Все как и там, но удерживающие силы разные. У Цвета адсорбция, а тут растворение. Но как выдержать в каждом опыте одинаковые условия? Ведь целый ряд аминокислот уже известен, но какие из них входят в белок — нет. Если провести опыты Цвета для смеси веществ, а затем для известной аминокислоты, то при абсолютно одинаковых условиях место в колонке, которое займет известная аминокислота, должно в точности соответствовать месту, которое она займет в опыте с неизвестной смесью. Такой метод установления природы веществ, входящих в смесь, ученые назвали «методом свидетелей».

Если использовать колонку, возникает несколько трудностей.

Во-первых, даже в двух опытах трудно соблюсти абсолютно одинаковые условия. Во-вторых, у Цвета вещества были окрашены, аминокислоты бесцветны. Правда, их можно «проявить» — окрасить каким-нибудь подходящим индикатором, который реагирует с компонентами смеси и образует окрашенные соединения. Но как ввести индикатор в колонку? Раствор индикатора сместит зоны, размоет картину разделения.

И вот тут ученым пришла блестящая идея: органическим экстрагентом пропитать фильтровальную бумагу. Поместить на нее каплю испытуемой смеси и конец бумажной полоски погрузить в воду или в водный раствор. За счет капиллярных сил водный раствор впитывается в бумагу, увлекает за собой смесь. Компоненты смеси удерживает экстрагент, которым пропитана бумага. Когда какое-то вещество переходит из водного раствора в селективный экстрагент, то оно распределяется между двумя не-смешивающимися фазами. В опыте Мартина и Синга как раз и происходит подобный процесс. Поэтому предложенный ими метод получил название — «распределительная хроматография на бумаге».

Применение этого метода в химии белков произвело настоящую революцию. Почему же метод оказался таким плодотворным? Бумага, особенно если ее специально готовить, достаточно однородна — вот и одинаковые условия опытов. Она устойчива и имеет форму листа. Это обстоятельство позволяет без всяких затруднений использовать метод свидетелей.

Для проведения анализа методом хроматографии на бумаге достаточно 1 ■ 10~⁸—5-Ю^-9 г вещества. Такой чувствительностью могут похвастаться немногие методы анализа.

А. ЧЕКМАРЕВ, кандидат химических наук

54