Тело человека №91, страница 14

ПАТОЛОГИЯ: Клиническая цитогенетика

Диагностика аномалий

При обнаружении у ребенка делеции или дупликации родители также подвергаются хромосомному анализу с целью выявления сбалансированной аномалии, которую ребенок унаследовал в несбалансированной форме.

Подозрение на носительство сбалансированной мутации одним из родителей возникает при бесплодии пары или повторных самопроизвольных абортах.

В таких случаях паре предлагают генетическое консультирование, в результате которого определяют вероятные последствия для других членов семьи, а также риск рождения ребенка с хромосомными аномалиями.

тесты плода Для проведения хромосомного анализа испо/ ьзуются клетки плода, которые могут быть получены различными методами:

Амниоцентез - проводится при сроке беременности около 16 недель. Плодовые клетки и жидкость получают из полости матки с помощью тонкой иглы через брюшную стенку. Процедура выполняется под контролем ультразвука во избежание повреждения плода.

Биопсия ворсин хориона -исследование возможно уже в 10 недель беременности. Клетки получают из ворсин хориона, которые являются частью плаценты.

ВИЗУАЛИЗАЦИЯ ХРОМОСОМ Полученные клетки подвергаются цитогенетическому обследованию для определения кариотипа плода. При выявлении хромосомных аномалий на родителей ложится вся тяжесть принятия решения о судьбе беременности.

^ Во время беременности образцы клеток плода получают путем биопсии ворсин хориона с последующим исследованием хромосомного материала.

Технологии молекулярной цитогенетики

Выделяют особую группу синдромов, связанных с делеция-ми, выявление которых находится на грани возможностей микроскопа. Примером так называемых микроделеций является синдром Ди Джорджа. Патология включает пороки сердца, гипофункцию тимуса и паращитовидных желез, а также лицевые аномалии.

Более 90% микроделеций происходят в длинном плече 22-й хромосомы, и примерно половина из них наследуется.

Технолотя fish

Цитогенетическая диагностика этого и других синдромов микроделеций проводится с помощью особой технологии -флюоресцентцной гибридизации in situ (FISH). Фрагменты

Л Хромосомы окрашены флюоресцентными зондами (FISH), которые связываются со специфическими участками ДНК и затем исследуются в УФ-свете.

А Клетки исследуют под микроскопом с целью определения кариотипа (хромосомного состава). Этот анализ позволяет диагностировать хромосомные аномалии.

ДНК, известные как зонды, маркируются флюоресцентным красителем и добавляются к препарату метафазных пластинок. Зонды связываются со специфическими участками хромосом, которые впоследствии идентифицируются в УФ-свете. В нормальной клетке определяются два флюоресцентных сигнала, в аномальной - только один.

«Роспись» хромосом

Дальнейшее применение этот метод находит в технологии «росписи» хромосом, при которой используется набор ДНК-зондов, специфичных для какой-либо одной хромосомы. При их добавлении в препарат метафазных пластинок определенная хромосома «окрашивается» полностью.

Описанная технология особенно эффективна при диагностике малых транслокаций, а также дупликаций и инверсий.